PG电子的TurboTEV蛋白酶是一种半胱氨酸蛋白酶，包含了烟草蚀刻病毒（TEV）N1a蛋白催化片段的增强形式。该蛋白酶能够识别Glu-Asn-Leu-Tyr-Phe-Gln-Gly的特定切割位点，并在Gln和Gly之间进行切割。TurboTEV蛋白酶在4°C下展现出良好的活性，具有高特异性和出色的稳定性，且无需特殊缓冲液，适合在不同的缓冲条件下使用，以满足目标蛋白的需求。

它的分子量为52 kDa，带有GST和His标签，便于通过Ni螯合或谷胱甘肽（GSH）树脂轻松去除显性标签。TurboTEV蛋白酶的来源为大肠杆菌，活性超过10单位/µg，意味着1单位的TurboTEV蛋白酶可在30°C条件下裂解3 µg底物的85%。

使用协议

在实验过程中，推荐的步骤如下：

1. 配置裂解缓冲液

首先，准备新鲜的冷透析缓冲液，以下是一个示例配方：25 mM Tris-HCl (pH 8.0)、150-500 mM NaCl、14 mM β-巯基乙醇。

2. 稀释目标蛋白样品

使用透析缓冲液将目标蛋白样品稀释至1-2 mg/mL。如果目标蛋白在透析缓冲液中发生聚集，可选择省略此步骤。同时，预留少量未处理的样品以供后续分析。

3. 加入TurboTEV蛋白酶

按照1:100（w/w）的比例添加TurboTEV蛋白酶，即100 mg目标蛋白需配备10000 Units（1 mg）的TurboTEV蛋白酶。

4. 透析处理

在4°C条件下，使用透析缓冲液透析过夜（约16小时）。

5. 去除TurboTEV蛋白酶

处理完成后，可通过柱层析进一步去除TurboTEV蛋白酶。

产品应用

TurboTEV蛋白酶在以下领域的应用广泛：

• 蛋白裂解功能
• 从重组蛋白中去除融合标签
• 蛋白质和肽的纯化

常见问题解答

1. TEV消化反应的缓冲液条件有多重要？

指定的反应环境（如25 mM Tris-HCl、pH 8.0、150 mM NaCl和14 mM β-巯基乙醇）对TurboTEV的剪切效率至关重要。以下成分可能产生不良影响：

• (a) 1 mM DTT - 可接受
• (b) 10% 甘油 - 不推荐使用
• (c) 20 mM 组氨酸 - 不推荐使用
• (d) 500 mM NaCl - 不建议使用
• (e) 100 mM Tris - 不建议使用
• (f) β-巯基乙醇 - 可以添加

2. 在剪切之前，是否需要缓冲液交换蛋白质？

这可能是必要的，以确保最佳反应条件。

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