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NEWSPG电子 PCR温度梯度功能简介
来源:上官桂腾 日期:2025-03-31PCR(聚合酶链式反应)是一种用于在体外快速扩增特定DNA片段的生物技术。其核心原理在于模拟DNA的自然复制过程,通过DNA聚合酶实现高效的DNA扩增。这一过程涉及三个主要步骤:变性、退火和延伸,这三者交替进行,形成一个循环。每完成一次循环,DNA的数量便会翻倍,经过多次循环最终可以获得大量目标DNA片段。
为了建立一个成熟稳定的PCR反应体系,需要满足以下几个条件:
确保拥有完整且纯净的模板,通常需要通过凝胶电泳和纳米滴定仪(nanodrop)进行评估。
使用高特异性和高品质的引物,建议通过引物设计软件进行评分,以确保引物的有效性。
反应体系的组分搭配需适合,例如考虑模板的GC含量,是否需添加DMSO或甜菜碱等。此外,根据所需的保真度或产量来调整镁离子浓度。
合理的扩增反应程序通常与PCR仪器密切相关。在引物Tm值附近开展多次实验以确定最佳退火温度。如果PCR仪器具备温度梯度功能,可以通过设置不同温度,快速识别最佳条件。
作为国产品牌,PG电子的柏恒梯度PCR仪具备多项温度梯度功能,帮助用户高效进行PCR实验:
在首尾两端设定退火温度的范围,中间孔位则依次分布不同的温度。
中间设定一个基础温度,并按温差向两侧扩散,相邻孔位的温度严格按照设定的温差生成。这一功能允许同时验证多个感兴趣的整数温度,极大提高了实验效率。
反应模块的纵向和横向可同时设置常规或线性梯度,通过一次反应探索出最佳的变性和退火温度组合,进一步增加PCR反应的特异性和产物的纯度。
此技术允许相邻温区的温差不超过5℃,并提供16孔作为复孔位,能够灵活设置温度,类似线性梯度的升级版。
PG电子的柏恒梯度PCR仪采用前进风后出风的散热模式,即使多台仪器并排使用,也能确保温控准确。通过这些技术,您可以极大缩短实验周期,提升PCR的效率和准确性。
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